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HPLC峰值故障排除指南
点击次数:332 发布时间:2019-01-17

HPLC故障排除指南-峰值


峰形问题

 

 

 

峰拖尾

与活性硅醇的相互作用

1. 使用超高纯度硅基(硅胶基质)固定相

(见1.1

2. 添加碱性流动相添加剂(如TEA超高纯度相则不需要

在固定相中与金属离子螯合

同上

错误的流动相pH值(流动相pH值不当)

1. 降低流动相pH值以抑制硅烷醇电离(见1.2

2. 增加缓冲液浓度(见1.2

玻璃料阻塞(筛板堵塞)

1.  倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2

2.  使用串联(在线)过滤器(见1.34.2

柱无效(色谱柱失效)

1.  倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2

2.  更换柱 (色谱柱)

死体积未清扫(过大)

1. 尽量减少连接器数量

2. 使用较短的连接管

3. 检查所有配件是否紧固

分裂峰

保护柱或分析柱入口(进样)端污染

1.        拆下保护柱卡套(卸除保护柱芯)并进行分析 必要时更换保护柱

2.        倒冲洗(反冲)分析柱(见5.2

3.        对于顽固残留(强保留污染物),应尝试再生法(对色谱柱进行再生)(见5.2

4.        更换柱

玻璃料阻塞 (筛板堵塞)

1.  倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2

2.  使用串联(在线)过滤器(见1.34.2

样品溶剂与流动相不兼容

1. 在流动相中注入样品 (用流动相溶解样品)

同时洗脱第二组分

1.        注射前使用样品清理 (进样前先净化样品)

2.        通过改变流动相或柱相(色谱柱固定相) 来改变选择性

柱超载(色谱柱过载)

1. 使用更高容量的固定相

2. 增加柱的直径 (增加色谱柱内径)

3. 减少样本(样品)量

 

柱中通道的形成 (色谱柱内形成通道)

1.        更换柱 (色谱柱)

2.        在建议的色谱柱(色谱柱建议的)pH值范围内操作(见1.5

柱超载 (色谱柱过载)

1.        注入更少量或更稀释的样品溶液 (减少进样体积或进一步稀释样品)

2.        使用更高容量的固定相

样品溶剂与流动相不兼容

1在流动相中注入样品(用流动相溶解样品进样)

低温

1. 增加柱的温度 (升高柱温)

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